Витальная микроскопия
Что это
Сайт посвящён любительским наблюдениям живых микроорганизмов через световой микроскоп с применением специальных методов визуализации слабоконтрастных объектов. Возможно, фото- и видеозаписи, размещённые здесь, покажутся интересными кому-нибудь кроме авторов сайта.
Как это выглядит
Фазовый контраст. Возможно, наиболее универсальный метод повышения контрастности, хорошо подходящий для любых увеличений, и пригодный как для непосредственного изучения микромира, так и для последующей машинной обработки изображений. | |
Дифференциально-интерференционный контраст по Номарскому, или ДИК. Один из самых сложных и эффектных методов световой микроскопии. К сожалению, в данный момент автору сайта метод временно недоступен из-за отсутствия оборудования. | |
Тёмное поле. Темнопольная микроскопия — относительно простой, очень доступный и очень эффектный метод. При правильной настройке его эффективность вполне сравнима с гораздо более изощрёнными фазовым контрастом и ДИК. | |
Косое освещение. Один из самых простых способов повышения контрастности в световой микроскопии. Замечательно подходит для наблюдения сравнительно крупных объектов через объективы с увеличением до 10× и большой глубиной резкости. |
Зачем всё это нужно
Пропаганда витальной микроскопии в данном случае является частью более широкой идеи о неразрушающей исследовательской работе. «Оставляйте только круги на воде, увозите только впечатления», как говорят водолазы. Впечатления в данном случае имеются в виду в том числе и вполне материальные, такие как фотографии, рисунки, аудио- и видеозаписи.
К сожалению, в современном научном мире считается нормой, скажем так, приведение изучаемого объекта в соответствие с имеющимися у исследователя методами и инструментами. Помимо очевидной сомнительности такого подхода с морально-этической точки зрения, есть ещё и менее очевидная, но не менее важная причина искать альтернативу: погрешность результатов наблюдений, вызванная воздействием наблюдателя тем выше, чем значительнее воздействие наблюдателя на наблюдаемый объект.
Таким образом, неразрушающие методы исследования не только пропагандируют гуманное отношение к окружающему нас миру, но и позволяют открывать его с новой, возможно, недостаточно хорошо изученной стороны.
Кроме того, изучать микромир очень интересно. И результатами наблюдений хочется делиться.
Постановка задачи
Слабоконтрастные объекты типа живых клеток, в том числе — одноклеточные животные, в обычном проходящем свете видны очень плохо. Из этой ситуации есть несколько выходов: умертвить их и покрасить «красивою зелёною краскою»; повысить контрастность изображения путём закрытия апертурной диафрагмы ценой уменьшения разрешения; использовать специальные техники визуализации слабоконтрастных объектов.
Первый вариант, как уже выяснилось, не подходит по ряду причин. В том числе потому, что за живыми животными наблюдать гораздо интереснее.
Второй способ предполагает нежелательный компромисс в виде значительного уменьшения разрешающей способности оптической системы. То есть, например, очень сложно будет увидеть тонкие клеточные структуры типа ресничек или жгутиков.
Таким образом, остаётся третий вариант — использовать специальные техники визуализации. Подробнее о них можно почитать, например, на сайте Microscopy Primer в разделе «методы визуализации слабоконтрастных объектов».
Благодарности
Когда личный интерес в каком-то деле доходит до определённой важной точки, необходимо, чтобы рядом оказался Наставник. Огромное спасибо Александру Александровичу Карпенко — замечательному микроскописту, учеником которого автору этого сайта хотелось бы себя считать.
Спасибо Вадиму Владимировичу Кумейко и Сергею Викторовичу Плотникову — моим товарищам, с которыми каждую субботу 25 лет назад мы начинали свой рабочий понедельник.